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项目名称
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舌苔脱落细胞检测 |
所属实验课程
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中医诊断学 |
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学年度
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2009-2010 |
学期
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02 |
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专业分类
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中医学 |
关键词
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舌苔 |
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实验要求
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选修 |
带课教师
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陈启松 |
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实验目的
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理解各类舌苔的上皮脱落细胞的层次、形态、数量和分布与机体证型间关系； 学习常用的组化染色方法。 | ||
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基本描述
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【实验材料】 仪器：压舌板、载玻片、光学显微镜 试剂：脱落细胞检测所需试剂：蒸馏水、0.5％稀盐酸溶液、95％乙醇溶液、二甲苯、苏木素染液、稀碳酸锂溶液、EA36溶液、无水乙醇、中性树胶 【实验方法】 （一）舌苔脱落细胞检测 测定方法： 1、舌苔标本的采集：受试者于试验前一晚睡前漱口，漱口后不再进食或抽烟(但可饮水)。试验当天，受试者处基础状态，自然伸出舌头，测试者(同一人)用中等力度从受试者舌中部刮取舌苔，用推片法涂于载玻片上。每个受试者共做两片。 制片后应待其自然干燥，也可持片在空气中挥动，但不能用明火烤干，以免细胞变形。标本干燥后应立即用记号笔在制片厚的一侧写上受检者的姓名或编号，防止混淆。 2、固定 固定液：95％乙醇和乙醚等量混合。 处理：待标本自然干燥之后置入乙醇固定液中15~30分钟即可。 3、巴氏染色 加水：舌苔制片固定后，静置蒸馏水中2分钟。 染核：置苏木素染液中10~15分钟，取出用水冲净。 分色：置0.5％稀盐酸中，3秒后立即取出，彻底水冲，以脱去胞浆内多余的苏木素染液，使核的着色与红色的胞浆对比更鲜明。因此分色时切勿过长，以免细胞核褪色。 蓝化：置稀碳酸锂溶液中1分钟，取出水冲，以蓝化细胞核，使涂片变蓝。 脱水：置95％乙醇中2分钟。 染浆：置EA36染色液中4~5分钟，直至胞浆着色鲜明为止。 清洁：置95％乙醇3杯中洗涤三次，每次各1分钟，去掉多余的染料。 脱水：置无水乙醇中2分钟。 透明：置二甲苯内2分钟。 染色结果 上皮细胞：核染深蓝或紫蓝色。胞浆受色根椐细胞类型和分化程度不同，可染成蓝绿色、湖蓝色、粉红色或橙黄色。白细胞：核染深蓝黑色，胞浆淡蓝绿色。红细胞：鲜红色。 4、光镜观察：首先用低倍镜(10×10)测览全片，以察其背景是否清晰(没有或少有白细胞、细菌及其他杂质)，较浊(能见到较多的白细胞、细菌及杂质)或者混浊(有成堆的白细胞、细菌及杂质);再用高倍镜(10×40)分别检测玻片上皮细胞、白细胞等指标，均按一定顺序和刻度观测标本四角及中央处共5个视野，计算中层细胞、角化前细胞、角化细胞及完全角化细胞四种细胞总数及其分类(构成比)。 | ||
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该实验涉及到的
主要仪器设备 |
无 | ||
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实验总人数
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120 |
每组人数
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2 |
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实验学时
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3 |
是否特色
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是 |
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实验地点
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广州中医药大学基础楼510、512、514实验室 | ||