教学目的、要求：

掌握PCR原理，PCR技术体系的反应物与最适条件，试刘的配制与操作步骤及事项；了解PCR技术种类，PCR技术在现代生物化学与生命科学上的应用。

教学重点及难点：

      PCR扩增原理，标准PCR扩增方案，与PCR相关的技术及PCR技术的应用；难点是PCR扩增原理，标准PCR扩增方案。

核心知识：

PCR扩增原理

• PCR反应的概念：聚合酶链式反应,即模仿生物自我复制DNA链。

• DNA模板：碱基组装的原型（变性）。

• 引物：起始p位先合并（DNA片段，根据模板设计的）（退火）。

• dNTP：四种脱氧核苷酸。

• 缓冲液：buffer。

• Taq DNA 聚合酶：热稳定组装碱基    （延伸）。

标准PCR扩增方案

• 标准的PCR反应体系

• 设计引物应遵循以下原则

• 温度程序

• 对PCR反应中非主要组分的分析

与PCR相关的技术及PCR技术的应用

• 反转-PCR技术(RT-PCR)；

• RAPD即随机扩增多态性DNA技术；

• mRNA差示技术（m RNA-differential display technique，m RNA-DD-PCR）；

• 差减法杂交；

• 免疫PCR（Immuno-PCR）；

• 反相PCR（Inverse PCR）；

• 不对称PCR（asymmetric PCR）