荧光免疫技术

原理

应用荧光素标记的抗体或抗原进行免疫沉淀反应,然后置于荧光显微镜下观察。此法有利于微量可溶性抗原的检查和鉴定。

材料与试剂配制

1.荧光素标记抗体(或抗原)

2.待测可溶性抗原(或抗体)

3.醋酸纤维膜(10cm×2.5cm)

4.0.05Mol/L pH8.2巴比妥缓冲液

5.洗涤液 pH10.0的巴比妥缓冲液。

6.液体石蜡

操作方法

1.取5μl待测抗原进行膜电泳(见醋酸纤维膜电泳一节)电压6V/cm~10V/cm,电流0.4mA/cm,电泳2h。

2.取下膜放入湿盒内,沿抗体槽的位置放一条含标记抗体滤纸条(约10μl),在室温中孵育过夜。

3.去掉抗体纸条,将膜浸在洗涤液中1h。

4.流水中冲洗10min,置室温干燥。

5.干后浸入液体石蜡中使其透明10min。

6.用荧光显微镜观察荧光弧。