问 题 | 可能原因 | 建议解决方法 |
推荐电压条件下电泳时间过长 | 电泳缓冲液过稀 | 配制新鲜缓冲液,使用1X稀释液 |
推荐电压条件下电流过高,热量过大 | 电泳缓冲液过稀 | 配制新鲜缓冲液,使用1X稀释液 |
推荐电压条件下电流过低或无电流 | 接触不良 | 在电泳前移除胶盒底部的封条; 确认缓冲液没过加样孔; 检查buffer core上导线连接 |
蛋白带型条状(streak) | 上样过量样品中盐浓度过高 | 降低蛋白上样量 通过透析或凝胶过滤降低样品中的盐浓度 |
样品沉淀 | 加大样品中SDS的浓度 | |
样品中的污染,如脂类或DNA 复合物 | 离心或过滤样品以除去特定污染 | |
制胶不佳 | 确保灌胶均匀,一次完成 | |
条带模糊 | 蛋白样品部分变性 | 完全变性蛋白 |
蛋白样品部分还原 | 确保加入足够量的DTT或β巯基乙醇。 | |
电泳时间过长 | 观察前面的指示剂染料,掌握恰当的电泳时间。 | |
哑铃形条带或 “微笑”条带 | 上样体积过大导致不完全堆积 | 使用恰当的上样体积, 如果样品过稀,使用超滤浓缩。 |
电泳过程中电场不均匀 | 如果蛋白浓度已知,上样时确保对称。 | |
分离胶表面不平 | 在制胶时使分离胶表面水平。 | |
凝胶过期 | 在指定的失效期前使用凝胶。 |