教学目的、要求：

    了解目的基因获得的四种方法： DNA文库、 cDNA文库、 化学合成法、PCR法                             

教学重点及难点：

DNA文库和cDNA文库的构建步骤。

课时安排：2学时

主要内容：

目的基因：结构基因的组成及排列方式

目的基因获得的方法：

       直接分离法—— DNA文库

       逆转录法  —— cDNA文库

       化学合成法

      PCR法

基因组文库的构建一般包括下列基本步骤：

     ①细胞染色体大分子DNA的提取和大片段的制备

     ②载体DNA的制备

     ③载体与外源大片段连接

     ④体外包装及基因组DNA文库的扩增

     ⑤重组DNA的筛选和鉴定

构建cDNA文库通常包括：

     ①mRNA的提取及其完整性的确定；

     ②cDNA的合成和克隆；

     ③目的cDNA的鉴定等步骤。

化学法合成目的基因方法：

磷酸二酯法

  亚磷酸三酯法

寡核苷酸连接法