教学目的、要求:
掌握基因显微注射技术;
了解转基因动物研究大致分为以下3个部分((1)上游部分(2)中游部分 (3)下游部分);
熟悉外源DNA导入动物细胞的方法。
教学重点及难点:
将基因转移入哺乳动物细胞的几种主要方法;
难点是永久性细胞系,共转染,瞬时表达。
课时安排:1学时
主要内容:
动物基因工程分为动物细胞基因表达技术和动物转基因技术两个层次:
前者主要利用动物工程细胞大规模生产蛋白多肽物质或作为药物筛选研究的体外(in vitro)评价模型。后者则通过转基因动物个体进行动物遗传性状的改良或作为药物筛选研究的体内(in vivo)评价模型及人体的基因治疗。
转基因动物技术已经经历了近20年的发展历史,从原理、技术及在生命科学研究领域中的应用来看,可将转基因动物研究大致分为以下3个部分:
(1)上游部分
(2)中游部分
(3)下游部分
外源DNA导入动物细胞的方法:磷酸钙转染技术;电穿孔转染技术;基因注射技术;脂质体载体法;DEAE—葡萄糖转染技术。
几种动物转基因技术: 显微注射法、转录病毒载体法、精子介导法、胚胎干细胞法、体细胞核移植
核心概念:瞬时表达、永久性细胞系、共转染