教学目的、要求:
掌握不同基因转化的方法与程序;
熟悉植物基因工程目的基因的类型
教学重点及难点:
植物转化系统的建立,植物基因转化方法;
难点是二元载体系统。
课时安排:3学时
主要内容:
植物基因工程中的目的基因大致可分以下几类:
(1)抗植物病虫害基因
(2)抗非生物胁迫、改良作物产品质量的基因
(3)改变植物其他性状的基因及植物医药基因
通过组织培养建立一个良好的植物转化系统主要包括以下方面:
(1)高频再生系统的建立
(2)抗生素敏感试验
(3)农杆菌的敏感性试验
植物基因转化方法可分为三大类:
①载体介导的转化方法,即将目的DNA插入到农杆菌的丁i质粒或病毒的DNA上,随着载体质粒DNA的转移而转移。共培养法及病毒介导法都属于这一类方法。
②DNA直接导人法,指通过物理或化学的方法直接导人植物细胞,物理方法有基因枪法、电激法、超声波法、显微注射法和激光微束法。化学法有PEG法和脂质体法。
③质系统法,包括花粉管通道法、生殖细胞浸泡法、胚囊和子房注射法。
思考题:
1.解释植物基因工程及其与常规育种相比的意义?
2. 世界上哪年获得第一株转基因植物?哪年发明基因枪?水稻哪年转化成功?
3. 解释报告基因和标记基因?
4. 植物基因工程载体种类?何为双元载体?具备那些特点?
5.抗性基因(Resistant gene)是目前使用的最广泛的选择标记,常用的抗生素抗性有哪几种?并举两例说明其原理?
6. 讲述农杆菌介导转基因的主要步骤?
7.讲述基因枪转化的原理和主要步骤?
8.讲述DNA微粒载体的制备原理?